Alessandro Nespolino nasce a Napoli il 2 dicembre 1971. Dopo il diploma in ragioneria, frequenta per due anni la Scuola Internazionale di Comics di Roma, iniziando a pubblicare per Fenix. Nel 1994 inizia a collaborare con Ade Capone, realizzando uno speciale di Lazarus Ledd (Star Comics) e alcune storie brevi. Disegna per conto della Scuola Italiana di Comix di Napoli un episodio della collana Il teatro di Eduardo a fumetti e La vita del Beato Bartolo Longo. Nel 2000 entra a far parte del team di disegnatori di Nick Raider, alternando quest'impegno con l'insegnamento presso la Scuola Italiana di Comix, attività che lo coinvolge dal 1996. In seguito lavora anche su Brad Barron, Volto Nascosto, Magico Vento, Shanghai Devil e Adam Wild. Quando Sergio Bonelli Editore ha cominciato ad adattare a fumetti le indagini del commissario Ricciardi creato da Maurizio de Giovanni, nel 2017, Nespolino è stato uno dei primi disegnatori a essere inserito nello staff della serie. Nel 2009 ha vinto il premio ANAFI come “Miglior disegnatore di fumetti italiani”.
